入秋了，又到了吃棗的季節(jié)。棗果不僅是滋補(bǔ)佳品，也是一味傳統(tǒng)的中藥，并且棗中含有多種糖類。糖類是自然界中廣泛分布的一類重要的有機(jī)化合物，是一切生命體維持生命活動(dòng)所需能量的主要來(lái)源。
在高效液相色譜儀(hplc)測(cè)試中，糖類的分子通常采用通用型檢測(cè)器檢測(cè)，如示差折光檢測(cè)器(ri)進(jìn)行檢測(cè)。但采用ri檢測(cè)器有兩個(gè)明顯的缺點(diǎn)：靈敏度低、不能梯度洗脫。采用磷酸-苯肼柱后衍生法測(cè)定糖類，可以克服ri檢測(cè)器的以上兩個(gè)缺點(diǎn)。
下面我們使用日立chromaster高效液相色譜儀，利用磷酸-苯肼柱后衍生法進(jìn)行糖類的分析。色譜柱將糖類分離，再與磷酸-苯肼溶液在高溫下反應(yīng)，使用有選擇性，高靈敏度的熒光檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，梯度洗脫可以多種糖成分同時(shí)分析。此方法克服了示差折光檢測(cè)器的靈敏度低和不能梯度洗脫的缺點(diǎn)。
■ 流路圖
儀器配置: chromaster 5110 泵，5210 自動(dòng)進(jìn)樣器，5310 柱溫箱，5410 uv檢測(cè)器，5510反應(yīng)單元
■ 標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定例
■ 系統(tǒng)適用性（100 mg/l 糖標(biāo)準(zhǔn)混合液）
分別對(duì)硅膠基質(zhì)和聚合物基質(zhì)色譜柱的系統(tǒng)適用性進(jìn)行評(píng)價(jià)，理論塔板數(shù)按蔗糖峰計(jì)算，分離度以葡萄糖和半乳糖的分離度計(jì)算，結(jié)果得到色譜柱的理論塔板數(shù)和分離度如上表所示。聚合物基質(zhì)色譜柱的測(cè)定，理論塔板數(shù)較低，但色譜柱的壽命較長(zhǎng)；硅膠基質(zhì)色譜柱的測(cè)定，色譜峰的峰形尖銳，分離度改善很多。后續(xù)實(shí)驗(yàn)均采用硅膠基質(zhì)色譜柱。
■線性
以半乳糖和蔗糖為例，各種糖成分在10 ~ 500 mg/l標(biāo)準(zhǔn)混合液的濃度范圍內(nèi)，r2 ≥ 0.9995，線性關(guān)系良好。
■ 重現(xiàn)性
■ 棗樣品的分析結(jié)果
對(duì)大棗樣品進(jìn)行了糖成分的分析，結(jié)果在棗中檢測(cè)到果糖、葡萄糖和蔗糖成分，并且均得到很好的分離效果。