分離出具生殖潛能干細(xì)胞
在母體中發(fā)育了50天的豬胎兒皮膚組織中分離出一些干細(xì)胞，這些干細(xì)胞具有某種分化成具有卵母細(xì)胞特性的細(xì)胞的內(nèi)在機(jī)制。
用誘導(dǎo)分化的條件培養(yǎng)基培養(yǎng)這些干細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其中的一個(gè)亞群可以表達(dá)一些只有sheng殖細(xì)胞才能特異表達(dá)的基因和蛋白。
根據(jù)形態(tài)學(xué)觀察，發(fā)現(xiàn)所培養(yǎng)的細(xì)胞從誘導(dǎo)分化的第10天開(kāi)始，形成了克隆樣結(jié)構(gòu)，其中的一些克隆樣結(jié)構(gòu)逐漸從培養(yǎng)皿上脫壁，呈“囊泡狀聚集體”懸浮于培養(yǎng)基中。在很多囊泡狀聚集體中央有一個(gè)較大的細(xì)胞，這與同sheng殖有關(guān)的卵母細(xì)胞復(fù)合體結(jié)構(gòu)非常相似。
如果將這些囊泡狀聚集體放入供卵母細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)基中，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的培養(yǎng)，囊泡狀聚集體中的細(xì)胞亞群可以將位于中央部分的大細(xì)胞擠出；進(jìn)一步培養(yǎng)這些“大細(xì)胞”，最終可以長(zhǎng)成直徑為80-100?滋m的細(xì)胞。
為了檢測(cè)這些大細(xì)胞是否表達(dá)了具有卵母細(xì)胞代表性的標(biāo)記分子，將這些大細(xì)胞挑出，分組提取rna。
rt-pcr的檢測(cè)結(jié)果表明，在這些“大細(xì)胞”以及作為陽(yáng)性對(duì)照的卵巢組織中，均可以檢測(cè)到所有卵母細(xì)胞特異表達(dá)的標(biāo)記分子物。